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索氏抽提器提取法實驗過程介紹

時間:2020-04-18 18:14     瀏覽:

索氏提取法對包含在組織內部的脂肪等不能完全提取出來,酸分解法常使磷脂分接而損失。而在一定的水分存在下,極性的甲醇及非極性的*混合溶液卻能有效地索氏抽提器提取結合態脂類,如脂蛋白、蛋白脂等及磷脂,此法對于高水分生物試樣如鮮魚、蛋類等脂類的測定更為有效。

 (1)原理

    *-甲醇提取法的原理是將試樣分散于*-甲醇混合液中,于水浴上輕微沸騰,-甲醇混合液與一定的水分形成提取脂類的有效溶劑,在使試樣組織中結合態脂類游離出來的同時與磷脂等極性脂類的親合性增大,從而有效地提取出全部脂類。再經過濾,除去非脂成分,然后回收溶劑,對于殘留脂類要用石油醚提取,定量。

  • 儀器

具塞三角瓶

    電熱恒溫水浴:50~100

    提取裝置

   布氏漏斗

   具塞離心管

   離心機:3000r/min

(3)試劑

    *:97%(體積分數)以上。

    甲醇:96%(體積分數)以上。

      *甲醇混合液:按2:1體積比混合。

     石油醚。

     無水硫酸鈉:以120~135干燥1~2h。  

(4)操作步驟

   提取  

    準確稱取均勻樣品5g于具塞三角瓶內(高水分食品可加適量硅藻土使其分散),加入60mL*-甲醇混合液(對于干燥食品,可加入2~3mL水)。連接提取裝置,于650C水浴中,由輕微沸騰開始,加熱1h進行提取。

   回收溶劑

    提取結束后,取下燒瓶用布氏漏斗過濾,并用*-甲醇混合液洗滌濾器,燒瓶及濾器中試樣殘渣,濾液、洗滌液一并收集于具塞三角瓶內,置65~700C水浴中回索氏抽提器收溶劑,至燒瓶內物料呈濃稠態,而不能使其干,然后冷卻。

  石油醚萃取、定量

用移液管加入25ml石油醚,然后加入15g無水硫酸鈉,立即加塞混搖1 min ,將醚層移入具塞離心沉淀管進行離心分離(3000r/min)5min.用10mL移液管加入迅速吸取離心管中澄清的石油醚10mL,于已稱量至恒量的干燥稱量瓶內,蒸發去除石油醚,于100~105烘箱中烘至恒量(約30 min )。

(5)結果計算

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